MoClo-YTK（Modular Cloning Yeast ToolKit）是一種專為酵母設(shè)計的模塊化克隆工具包，用于高效、靈活地組裝多基因遺傳回路或代謝通路。該工具包含有一組96 個已驗證的高活性啟動子、終止子、篩選標記等標準化元件，確?；虮磉_穩(wěn)定性和可重復性。它結(jié)合了Golden Gate Assembly的高效拼接方法和標準化模塊的設(shè)計理念，極大地簡化了復雜多基因構(gòu)建的流程。
MoClo-YTK按標準流程，可在三天內(nèi)從PCR 模板構(gòu)建多基因質(zhì)粒。其可用于自下而上分層組裝單基因和多基因構(gòu)建體，供釀酒酵母表達；其設(shè)計也兼容基于重組的克隆，如酵母體內(nèi)組裝、獨立連接克?。⊿LIC）或Gibson組裝。MoClo-YTK由合成生物學領(lǐng)域知名團隊開發(fā)，核心參考文獻為Lee ME 等人于2015年發(fā)表于《ACS Synthetic Biology》的研究成果，引用次數(shù)近600次，用戶反饋實驗成功率超95%。該工具包廣泛適用于合成生物學研究、酵母基因組工程、代謝通路優(yōu)化、多基因表達系統(tǒng)構(gòu)建等領(lǐng)域。
基于 MoClo 的標準化分層裝配策略
| Cat. NO. | Plasmid Name | Part Type | Part Description | E.coli Marker |
|---|---|---|---|---|
| SBDP250001 | pYTK001 | entry vector | Part Plasmid Entry Vector | Chloramphenicol |
| SBDP250002 | pYTK002 | 1 | ConLS | Chloramphenicol |
| SBDP250003 | pYTK003 | 1 | ConL1 | Chloramphenicol |
| SBDP250004 | pYTK004 | 1 | ConL2 | Chloramphenicol |
| SBDP250005 | pYTK005 | 1 | ConL3 | Chloramphenicol |
| SBDP250006 | pYTK006 | 1 | ConL4 | Chloramphenicol |
| SBDP250007 | pYTK007 | 1 | ConL5 | Chloramphenicol |
| SBDP250008 | pYTK008 | 1 | ConLS' | Chloramphenicol |
| SBDP250009 | pYTK009 | 2 | pTDH3 | Chloramphenicol |
| SBDP250010 | pYTK010 | 2 | pCCW12 | Chloramphenicol |
| SBDP250011 | pYTK011 | 2 | pPGK1 | Chloramphenicol |
| SBDP250012 | pYTK012 | 2 | pHHF2 | Chloramphenicol |
| …… | …… | …… | …… | …… |
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